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PreScission 蛋白酶

時間:2017-11-28 12:12:20 瀏覽:

 

產品編號

產品名稱

產品包裝

產品價格

P2308

TEV Protease

10000U

1298.00

 

產品介紹: 

TEV Protease是一種在大抽桿菌中重組表達的帶His標簽(6X His tag)的煙草蝕紋病毒(Tobacco Etch Virus, TEV)的半胱氨酸蛋白酶,能特異性地識別七肽序列Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly/Ser,并在GlnGly/Ser氨基酸殘基之間進行酶切,常用于去除融合蛋白的Glutathione S-transferase (GST)His或者其它標簽的蛋白酶。
建議把GSTHis等標簽設計在融合蛋白的N端,并在GSTHis等標簽與目的蛋白之間設計加入TEV Protease專一性識別與酶切的上述七肽序列。這樣在GSTHis標簽被酶切后,在目的蛋白的N端僅有一個額外的Gly/Ser氨基酸殘基,從而最大限度地減少了對目的蛋白結構和功能的影響。構建含有TEV Protease專一性識別位點的目的蛋白表達質粒,可以考慮選購碧云天的質粒pET-N-His-TEV (P2905)
TEV Protease
的最佳的酶切溫度是30℃,但在4-30℃和pH6.0-8.5范圍內皆有活性。因此在實際操作過程中,為盡量保留目的蛋白的結構和生物活性,建議在4℃酶切過夜。
TEV Protease
還有一個突出的優點是在400mM咪唑中仍有較高活力,因此對于很多用鎳柱純化的His標簽目的蛋白,可直接將TEV Protease加入含高濃度咪唑的剛剛純化的目的蛋白溶液中,在4℃邊透析去除咪唑邊進行酶切。當然也可以在透析后再用TEV Protease進行酶切以去除His標簽。經過酶切的目的蛋白,溶液中帶有His標簽的本TEV Protease以及切除下來的His標簽,都可以通過與鎳柱結合而去除。His標簽蛋白的純化可以考慮選購碧云天的BeyoGold? His-tag Purification Resin 
(
P2210/P2218/P2220)
His標簽蛋白純化試劑盒(P2226)

酶活性單位定義:30℃,pH8.0條件下反應1小時,能夠切割3μg對照底物達85%以上所需的酶量為一個活性單位。
碧云天TEV Protease酶活性鑒定結果可參考圖1

           

1.TEV Protease切割GST標簽蛋白的效果圖。含有TEV Protease識別位點的76kD GST標簽蛋白與 TEV Protease進行反應,底物的用量為3μg,酶的用量依次為00.10.250.50.6712U30°C1X TEV Buffer中反應1小時后取樣進行
SDS-PAGE
電泳和考馬斯亮藍染色。酶切產物大小為約50kD的目的蛋白和約26kDGST標簽。

TEV Protease分子量大小約28kDa,純度:≥95%
TEV Protease
儲存液組成為:25mM Tris-HCl, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 5mM DTT, 50%(v/v)甘油, pH8.0
10X TEV Buffer
組成為:500mM Tris-HCl, 500mM NaCl, 5mM EDTA, 10mM DTT, pH8.0
本產品一個包裝含有10000單位的酶,可用于約30mg帶有TEV Protease識別位點的融合蛋白的切割。

包裝清單:

產品編號

產品名稱

包裝

P2308-1

TEV Protease (1U/μl)

10ml

P2308-2

10X TEV Buffer

20ml

說明書

1

 

保存條件:
      -20
℃保存。
注意事項:
      
本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
      
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

    說明書下載.pdf

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